真菌熒光染色技術(shù)是近幾年發(fā)展起來的革命性技術(shù),以其高特異性、高效率、高靈敏度等成為真菌形態(tài)學(xué)檢測的重要手段。這項技術(shù)可用于各種真菌檢測,如體癬、股癬、手足癬、甲癬、頭癬、花斑癬、霉菌性陰道炎、霉菌性肺炎、霉菌性腸炎、鵝口瘡等,還可用于檢測部分寄生蟲。
真菌熒光染色的檢驗原理:
熒光素能與真菌細胞壁的β-多糖物質(zhì)相結(jié)合,如纖維素、幾丁質(zhì)等,但不能與組織細胞結(jié)合。熒光素在紫外線激發(fā)光下使各種絲狀真菌及酵母菌呈現(xiàn)熒光,包括念珠菌屬、毛蘚菌屬、表皮蘚菌屬、小孢子菌屬、組織胞漿菌屬及曲霉屬等。染液中氫氧化鉀能溶解樣品組織中的角質(zhì)、消除雜質(zhì),促溶劑的加入使得樣品組織中的角質(zhì)溶解的更加迅速,組織更加透明,提高了檢測靈敏度。選取的背景復(fù)染液能降低樣品組織的背景亮度,使熒光信號更加清晰。
真菌熒光染色的樣本要求:
1.皮屑、甲屑、毛發(fā)標本:先以75%酒精消毒病變部位,以鈍手術(shù)刀刮取皮屑或甲屑適量;以鑷子拔取病發(fā)數(shù)根,置玻片上。
2.組織液涂片或者病理切片按常規(guī)病理染色前固定、脫水、脫蠟等步驟進行準備。
真菌熒光染色的檢驗方法:
1.將標本置潔凈玻片上;
2.滴加染液,讓染液覆蓋整個標本;
3.蓋上蓋玻片,等待1分鐘;
4.吸去多余染液,在熒光顯微鏡下觀察玻片。